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流式細胞術的發(fā)展意義重大

點擊次數(shù):2978 更新時間:2019-03-14
流式細胞術 (Flow Cytometry)是70年代發(fā)展起來的一種利用流式細胞儀對細胞等生物粒子的理化及生物學特性(細胞大小、DNA/RNA含量、細胞表面抗原表達等)進行定量、快速、客觀多參數(shù)相關檢測分析的新技術。它借鑒了熒光顯微鏡技術與血球計數(shù)原理,同時利用熒光染料,激光技術,單抗技術以及計算機技術的發(fā)展,大大提高了檢測速度與統(tǒng)計性,而且從同一個細胞中可以同時測得多種參數(shù),為生物醫(yī)學與臨床檢驗學發(fā)展提供了一個全新的視角和強有力的手段。
 
  FCM在生命科學中的應用,標志著細胞生物學、腫瘤學、免疫學等進入了細胞和分子水平的研究。為從微觀認識細胞及橫向比較特征提供了精密、準確的方法和儀器。
 
 
  1、流式細胞儀系統(tǒng)流程:
 
標本→激光系統(tǒng)→流動系統(tǒng)→信號處理系統(tǒng)→放大系統(tǒng)→計算機系統(tǒng)→結果打印
 
  2、基本原理:
 
  待測標本制備成單細胞懸液通過熒光染色后進入充滿鞘液的流動室,鞘液壓力與樣品流壓力是不同的,當二者的壓力差異達到一定程度時,鞘液裹挾著樣品流中細胞排成單列逐個經(jīng)過激光聚焦區(qū)。如果我們將細胞中感興趣的部分特異性的標上熒光染料,那麼這些染料將在細胞通過激光檢測區(qū)時受激光發(fā)出特定波長的熒光,通過一定波長選擇通透性的濾色片,我們可將不同波長的散射光、熒光信號區(qū)分開來,并送到不同的光電倍增管中,經(jīng)過一系列的信號轉換、放大,數(shù)字化處理,我們就可以在計算機直觀的統(tǒng)計染上各種熒光染料的細胞各自的百分率。選擇不同的單克隆抗體及熒光染料,我們可以利用FC同時測定一個細胞上的多種不同特征;如果對具有某種特征的細胞有興趣,我們還可以利用流式的分選功能將其分選出來,以便進一步培養(yǎng)、研究。
 
  3、意義:
 
  FCM與單克隆抗體結合,可對細胞表面和細胞內(nèi)抗原、癌基因蛋白及膜受體進行定量檢測,成為臨床檢驗與研究的重要指標。流式免疫熒光技術不僅能將表達位點的細胞群區(qū)分開來,而且還能進一步區(qū)分各細胞亞群。對免疫功能障礙、造血系統(tǒng)疾病及惡性腫瘤的研究、診斷、治療和預后評估都能起到重要作用。
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